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一起儿童呼吸道腺病毒感染的调查

来源:中华实验和临床病毒学杂志
摘要:1996年6~9月,在湖北省荆州市城区及近郊儿童中有一批以发烧、咽红、咳嗽为主要症状的病儿,疑为呼吸道病毒感染。我们采集标本。25%胰酶冷消化,分装培养使成单层后,弃去营养液,每管接种标本0。2ml,每份标本接种3~4个细胞管,置37℃温箱1小时,然后弃去标本液加维持液,每天观察细胞病变,一般观察15天,未见细胞病......

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  1996年6~9月,在湖北省荆州市城区及近郊儿童中有一批以发烧、咽红、咳嗽为主要症状的病儿,疑为呼吸道病毒感染。我们采集标本。方法是5岁以上儿童采样前先咳嗽数次,然后将采样液(pH7.4肉汤)倒入口内,仰头让液体在咽喉部反复含漱约1分钟,吐回试管;5岁以下儿童用2支棉拭子于咽壁周围及扁桃体蘸取粘液,放入采样管内,立即送试验室。将咽漱液充分振摇,碎渣多者低速离心沉淀,取上清液加双抗(每毫升含青、链霉素各200U),置4℃冰箱4小时。取新鲜人胚肾组织,用0.25%胰酶冷消化,分装培养使成单层后,弃去营养液,每管接种标本0.2 ml,每份标本接种3~4个细胞管,置37℃温箱1小时,然后弃去标本液加维持液,每天观察细胞病变,一般观察15天,未见细胞病变者将细胞管冻溶数次,进行盲目传代。用深圳晶美生物工程有限公司提供的试剂盒检测血清特异性IgM抗体。

  结果46份标本经原代人胚肾组织培养,有7份发生细胞病变,细胞病变的特点是,细胞明显肿大,颗粒增生,细胞逐渐变圆聚集成葡萄状,最后自管壁脱落。对7份细胞病变典型的病毒管,作补体结合试验,有3份标本阳性,滴度1∶4,1∶4与1∶8。以中国科学院病毒研究所提供的3、7、11型腺病毒血清作中和试验(血清1∶2稀释),除3型腺病毒血清为阳性外余为阴性。将3型腺病毒血清作倍比稀释,上述7份标本均能被1∶5,1∶10稀释血清中和。同条件操作病毒对照管“++++”,正常细胞管阴性。结果,7例分出原病毒的患儿,有3例采集了急性期血清,取其血清作倍比稀释,每管0.2 ml,加入等量病毒液,37℃作用1小时,每管接种0.15 ml,当病毒对照出现“++++”,而细胞对照和血清对照均为“-”。以不出现病变或只有“±”病变最高血清稀释度,算作血清中和滴度,3份标本的中和抗体滴度分别为1∶8,1∶8与1∶16。经-20℃冻存3例急性期患儿血清标本,以ELISA法作腺病毒特异性IgM测定(复核),3份血清均为IgM阳性。

作者: 罗光荣丁建中 2004-9-24
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