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川崎病患者淋巴细胞P53基因的检测及临床意义

来源:中华微生物学和免疫学杂志
摘要:为探讨急性期川崎病(KD)患者外周血淋巴细胞凋亡延迟的机理,我们采用斑点杂交(Dot-blot)和流式细胞仪(FCM)分别检测KD患者淋巴细胞P53基因mRNA及蛋白质表达水平。Riddle赠送,以14例住院KD病人为研究对象,实验用外周血淋巴细胞,设4组:①正常儿童对照组。结果表明:1)正常对照DNA杂交浓度达50μg/μl时显蓝色,R......

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  为探讨急性期川崎病(KD)患者外周血淋巴细胞凋亡延迟的机理,我们采用斑点杂交(Dot-blot)和流式细胞仪(FCM)分别检测KD患者淋巴细胞P53基因mRNA及蛋白质表达水平。

  P53质粒为美国华盛顿大学Dr.Riddle赠送,以14例住院KD病人为研究对象,实验用外周血淋巴细胞,设4组:①正常儿童对照组;②治疗前KD病人组;③患者静脉注射免疫球蛋白(IVIG)组;④体外IL-6 McAb刺激组。结果表明:1)正常对照DNA杂交浓度达50μg/μl时显蓝色,RNA杂交浓度需100~200μg/μl时显蓝色,随浓度上升,斑点蓝色加深,KD患者外周血单个核细胞(PBMC)经anti-CD3刺激体外培养后,RNA杂交浓度需500~1000μg/μl时方显蓝色,当IVIG治疗后或PBMC体外培养加入IL-6 McAb时,RNA杂交浓度达200μg/μl可显蓝色,与正常对照组比较,KD患者外周血淋巴细胞P53基因mRNA表达水平降低,当IVIG治疗后或PBMC体外培养加入IL-6 McAb时,淋巴细胞P53基因mRNA表达水平明显提高;2)急性期KD病人外周血淋巴细胞P53蛋白质表达阳性细胞百分率(9.81±2.17)较正常对照组(30.57±15.38)明显降低,差异显著(P<0.001),当IVIG治疗后或PBMC体外培养加入IL-6 McAb时,P53蛋白阳性细胞百分率(分别为33.72±13.17和29.81±13.68)明显提高。P53是重要的抑癌基因,我们发现KD患者外周血淋巴细胞凋亡延迟,其机理可能与本病患者异常升高的IL-6有关。异常增高的IL-6对外周血淋巴细胞P53基因表达有抑制作用。据此推测,KD患者异常升高的IL-6通过抑制外周血淋巴细胞P53基因表达而导致淋巴细胞凋亡延迟,免疫耐受遭到破坏。

作者: 易岂建杨锡强李成荣王莉佳张远维 2004-9-24
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